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【產品推薦】鏈霉親和素(Streptavidin,SA)

來源:作者:人氣:-發表時間:2019-08-28 08:58:00【

鏈霉親和素 (Streptavidin,簡稱SA)
具有與生物素特異結合的能力,并能與HRP、AP、磁珠等結合,且等電點比親和素低,不含糖鏈,因而參與免疫學中的檢測信號放大,廣泛應用于ELISA、IHC、WB等實驗及親和色譜填料的制備、生物傳感器、生物芯片的制作。西寶生物提供優質的鏈霉親和素(Streptavidin,簡稱SA),靈敏度高、特異性好、結合能力強且穩定,咨詢熱線400-021-8158
1 概述:
【名稱】鏈霉親和素 (streptavidin,SA)
【貨號】ECL0006G
【分子量】60 kDa
【來源】大腸桿菌重組表達
【保存條件】-20℃保存
【有效期限】2 年
鏈霉親和素 (Streptavidin,簡稱SA),是鏈霉菌在培養過程中分泌的一種蛋白質產物。具有與生物素特異結合的能力,結合常數高達1015M。同時,由于鏈霉親和素等電點比親和素低,且不含糖基鏈,故在檢測中的靈敏度和特異性都高于親和素,建立在此基礎上的生物素-鏈霉親和素系統的應用比生物素-親和素系統有更大優勢。
2 結構:
鏈霉親和素是四聚體蛋白,大小為66KDa。一分子鏈霉親和素可以高度特異性地與四分子生物素結合,兩者之間的親和力極為強烈,鏈霉親和素-生物素復合物的解離常數處于10 mol/L數量級,這一性質常用于分子生物學用途。其中一條完整的SA肽鏈中有159個氨基酸殘基,分子量為16450。
3 質量指標:
Purity(SDS-PAGE)
≥95%
Purity(HPLC)
95%
Solubility
Colorless transparent liquid
pH
6.6~7.4
Identification 
Positive 
Appearance
White lyophilized powder, no visual foreign matters
4 用途:
鏈霉親和素可偶聯HRP、AP、生物素及磁珠等,參與免疫學中檢測信號的放大,廣泛應用于ELISA、IHC、WB等實驗及親和色譜填料的制備、生物傳感器、生物芯片的制作。

酶偶聯物標記的鏈霉親和素

辣根過氧化物酶標記的鏈和親霉素
1) 由高純度的鏈霉親和素和辣根過氧化物酶,通過特殊的偶聯技術生產;
2) 保持了過氧化物酶的高比活性。
應用于:免疫組化(IHC)、免疫細胞化學(ICC)、原位雜交(ISH)等領域。

堿性磷酸酶標記鏈霉親和素
1) 適合于固相分析,組織/細胞染色系統和印跡應用,選擇特定的共價連接;
2) 綴合物穩定并高活性。
應用于:免疫組化(IHC)、免疫細胞化學(ICC)、酶聯免疫斑點法(ELISPOT)、酶聯免疫吸附法(ELISA)、原位雜交(ISH)及印跡應用。

熒光基團標記的鏈霉親和素

熒光素標記鏈霉親和素
1) 在免疫熒光、原位雜交或流式細胞術等應用中可用于檢測生物素化的二抗和其他大分子;
2) 高度純化并具有非常低的非特異性結合特性;
3) 對生物素具有較高的親和力;
應用于:免疫熒光(IF)、原位雜交(ISH)、流式細胞術(Flow Cyt)。

鏈霉親和素酶標板

將鏈霉親和素直接或間接預包被在酶標板上,穩定性高,易于保存,使用時只要加入生物素化的抗體或者抗原即可。

5 應用領域:

6 注意事項:

1、凍干粉溶解后應避免反復凍融,建議分裝成小包裝后分別凍存;
2、溶解后立即使用效果最好,不能4°C長期存放;

7 實驗舉例&操作步驟: 

一、在ELISA實驗中用于包被和信號放大
1、用碳酸鈉緩沖溶液(pH 9.6)溶解凍干粉,將濃度稀釋成3-10ug/ml(客戶可設定梯度進行實驗)
注意:由于SA等電點是7.4,包被不建議使用中性緩沖液
2、用移液器吸取100ul/孔,4℃過夜包被或者37℃包被2h;
3、洗滌:倒盡板孔中液體,加200ul洗滌液,靜放三分鐘,反復三次,最后將反應板倒置在吸水紙上,使孔中洗滌液流盡,扣干
4、后續進入封閉、洗滌、抗原抗體結合流程
若不立即進入下游實驗,包被板需要進行烘干保存時。包被前,將包被液中加入20%蔗糖作為活性保護劑。

二、SA偶聯磁珠用于化學發光反應
2.1 NHS 活化
1、充分混勻磁珠后,取100μl 羧基磁珠到1.5 ml 離心管中,置于磁性分離上,待固液分離后去除上清液;
2、取200μl MES溶液(25mM,pH 5.0)加入到離心管中,置于磁性分離上,待固液分離后去除上清液。重復該步驟1 次;
3、迅速加入新配制的50μlEDC溶液和50μl NHS 溶液(均為50mg/ml,以上述MES配制)到裝有磁珠的離心管中,漩渦混勻使磁珠充分懸浮,室溫下垂直混合30min;
4、反應結束后,加入100μl 上述 MES 溶液洗滌 2 次;(活化狀態不宜長時間保存,建議立即進行偶聯)

2.2 蛋白偶聯
1、將離心管置于磁性上,分離去除上清液,加入100μl蛋白溶液(25 mM MES,pH 5.0)
輕柔地混勻;(蛋白濃度在0.1-2.0mg/ml)
2、在室溫下垂直混合反應2h,或在4℃條件下垂直混合過夜;
3、反應結束后將離心管置于磁分離架上,磁性分離去除上清液,加入1ml乙醇胺溶液(3M,pH9.0)洗滌磁珠 2 次;
4、加1ml乙醇胺溶液(3M, pH 9.0)于離心管中,渦旋30s,將離心管置于垂直混合儀中室溫反應1-2h;
5、反應結束后,將離心管置于磁力架上,待固液分離后移除上清液,然后加入100μl純化水輕柔渦旋 30s,磁吸分離,重復該步驟 1 次;
6、加入適量的保存液保存于4°,如果固定的生物配體穩定,可以在保存溶液中加入0.02%(W/V)疊氮化鈉作為抑菌劑。

8 相關產品列表: 
貨號 中文品名 英文品名 規格
164043 辣根過氧化物酶 Peroxidase(HRP)  100mg,1g
165801 堿性磷酸酶 Phosphatase, Alkaline 10mg,100mg
180101 3,3'5,5'-四甲基聯苯胺鹽酸鹽 TMB-2HCl 1g,5g,25g
160781 4-硝基苯基磷酸二鈉鹽,六水 PNPP-2Na 1g,5g,25g
164894 鄰苯二胺片劑 OPD Tablets 100 piece
188230 重組蛋白A Recombinant Protein A 1mg/10mg/100mg
188241 重組蛋白G Recombinant Protein G 1mg/10mg/100mg
188250 重組蛋白A/G Recombinant Protein A/G 5mg
188261 重組蛋白L Recombinant Protein L 1mg/10mg
AAS0038A EDC鹽酸鹽 EDC-HCl 5g/25g
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